Diseño y producción de antígenos recombinantes como biomarcadores de enfermedades infecciosas en humanos y animales

Calidad

Rekom Biotech se compromete a garantizar el más alto nivel de calidad en el diseño y producción de antígenos recombinantes como biomarcadores de enfermedades infecciosas en humanos y animales, para la industria de fabricación de sistemas de diagnóstico IVD.

Los productos de Rekom Biotech están diseñados, desarrollados, producidos y distribuidos de acuerdo con nuestro sistema de calidad, el cual está certificado por la norma ISO 9001. Los antígenos recombinantes de Rekom Biotech siempre son producidos de acuerdo con Procedimientos Operativos Estándar (POEs) y son sometidos a un riguroso control de calidad en nuestros laboratorios. Puedes consultar nuestra política del sistema aquí.

Rekom Biotech está autorizado a trabajar con organismos genéticamente modificados (OGM), con el número de licencia A/ES/14/I-10, emitida por la Comisión Nacional de Bioseguridad.

Rekom Biotech está registrada como PYME INNOVADORA, con una validez hasta el 10/12/2018.

Cada lote se somete a diversos análisis:

  • Detección de la concentración por espectrofotometría

    La medición de la concentración de proteína se realiza con el coeficiente de extinción teórico de la proteína recombinante obtenida a partir de Gill y vonHippel, 1989.

    Para las proteínas que no contienen residuos de Trp, existen evidencias de que esto podría dar lugar a más del 10% de error en el coeficiente de extinción calculado. Por lo tanto, nosotros medimos la concentración de proteína usando el ensayo colorimétrico basado en la interacción entre el azul brillante de Coomassie y la arginina y residuos aromáticos (Método Bradford), y su máximo de absorción se desplaza de 470 nm a 595 nm (Bradford, 1976).

  • Determinación de la pureza por SDS-PAGE

  • Análisis inmunológicos mediante ensayos de ELISA o Western Blot

    Para más información, eche un vistazo a nuestro artículo técnico "Experimentos de titulación"

    Curva de titulación mediante un esayo de ELISA

    En este gráfico, se comparan la densidad óptica a 450/620 nm para sueros IgG positivos (azul) y negativos (gris) para cada concentración del antígeno recombinante. Se emplea una prueba estadística apropiada de importancia para la comparación de medias entre ambos grupos, el test de Welch. Las concentraciones admisibles para la utilización del antígeno deben presentar diferencias estadísticamente significativas entre los sueros positivos y negativos. Esto sucede cuando los intervalos en la parte superior no se superponen y, lo que es equivalente, cuando el valor de p en la parte inferior está por debajo de 0,05. En la presente figura, todos los valores de p son inferiores a 0,05 y, por lo tanto, los intervalos no se solapan. De esta forma, cualquiera de las concentraciones mostradas se puede usar para distinguir entre sueros positivos y negativos.

  • Conjugación con biotina

    Conjugamos nuestros antígenos con biotina como un control interno de calidad para nuestros antígenos . Llevamos a cabo una estimación espectroscópica con HABA (4´-hydroxyazobenzene-2-carboxylic acid) de la relación mol a mol de biotina por proteína, también un ensayo de Western Blot con estreptavidina (A), y varios ensayos de ELISA (ensayo de ELISA indirecto en placas de microtitulación recubiertas de estreptavidina, ensayo de ELISA de captura con el antígeno recombinante biotinado como detector y ensayo de ELISA sándwich de doble antígeno (B)).

    Ensayo de Western Blot con estreptavidina

    (A) Ensayo de Western Blot con estreptavidina

    Ensayo de ELISA sándwich de doble antígeno

    (B) Ensayo de ELISA sándwich de doble antígeno

  • Conjugación con peroxidasa (HRP)

    También conjugamos nuestros antígenos con peroxidasa como un control de calidad interno. Llevamos a cabo un ensayo de ELISA sándwich de doble antígeno (C) y un ensayo ELISA de Captura mediante el uso de un kit comercial (D).

    Ensayo de ELISA sándwich de doble antígeno

    (C) Ensayo de ELISA sándwich de doble antígeno (DAS) realizado con sueros positivos y negativos de muestras de CMV IgM pre-validadas con el ELISA captura IgM VIDAS.

    Ensayo de ELISA Captura

    (D) Ensayo de ELISA captura realizado con dos diluciones diferentes de nuestra pp150-HRP, en un test comercial de referencia (prueba CMV-IgM-eLA PKS medac).